的蜘蛛血清实验室的重启实验当中，一不小心，他被蜘蛛咬了一口，从此获得了超能力，化身成为了蜘蛛侠。这是因为他父母研究蜘蛛血清的时候，是以自己家族基因为蓝本，只有帕克家族的直系血裔，被蜘蛛咬了，才能获得超能力。
大反派诺曼·奥斯本察觉出了哈里·帕克，依靠父母的遗泽，获得了本该属于他的蜘蛛血清能力，顿时化身了绿魔，想要抓住哈里·帕克，用来切片研究，复刻出本该属于他的蜘蛛血清，没想到他穿上了新研发出来的绿魔装甲，居然没有打赢哈里·帕克。
最后，大反派诺曼·奥斯本抓住了哈里·帕克的姨夫，逼着他来最后的决战，最终哈里·帕克靠着主角光环，杀死了绿魔诺曼·奥斯本，抱着死去的姨夫，姨夫告诉他一句话“能力越大、责任越大”，从此，蜘蛛侠成为守护纽约的超级英雄，纽约市民的好邻居。
彩蛋1：意图控制世界的大反派组织手合会，来源可以追溯到二战时期的德国，是曾经与美国队长作战的反派组织九头蛇的一个分支，口号“砍掉一个头，长出两个头”，嗯，手指头也是头嘛，虽然他们的一个合作者诺曼·奥斯本死去了，可是他们还有更多的合作者，比如科赫章鱼……一个小小的蜘蛛侠，必将被手合会一根手指头给碾死。
除了主线剧情之外，糖糖饰演的女主角，人设跟玛丽·简也有变化，更加倾向于格温，是一个完美女神，超能学霸，在帕克受到欺负后，还保护过帕克，只是糖糖越保护帕克，让校霸越发欺负帕克，因为校霸也喜欢糖糖，糖糖人见人爱，而在最后的大决战当中，也是糖糖协助蜘蛛侠救下了他的姨夫和姨妈，只是和蜘蛛侠亲如父子的姨夫受伤太重，留下一句遗言就噶了。
同时，《蜘蛛侠》电影还请了蜘蛛女侠的头号黑粉《号角日报》的老板詹姆斯友情客串，让他电影当中饰演自己，继续当蜘蛛侠的头号黑粉，因为听说可以在电影里面喷蜘蛛侠，詹姆斯连客串费都没有收，欣然应约。
另外，在隐藏后续剧情设定当中，还有糖糖也被蜘蛛咬了一口，化身幽灵蜘蛛，准备和蜘蛛侠并肩作战的片段彩蛋，只不过电影暂时没有拍板放不放这个，视情况而定。
“哥哥，你把自己父亲设置为电影大反派，奥斯本集团设置为反派组织，真的好么？”糖糖担忧的说道：“这不会给奥斯本集团带来不好的影响，导致股价暴跌吧？”
“没事！”白夜洒然一笑，说道：“这是他老人家自己的要求，要求我反向洗白奥斯本集团！因为在闹出了秃鹫和蜥蜴博士的事件后，奥斯本集团的股价已经暴跌过了，没有太多下降空间了。而我们奥斯本自己投资的电影，设置自己为大反派，